| 產(chǎn)品名稱 |
人卵巢癌組織源性原代細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-4278 |
| 組織來(lái)源 |
中國(guó)成年病人手術(shù)后的卵巢癌組織。 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 病理分類 |
1、漿液性囊腺癌為惡性卵巢腫瘤最常見(jiàn)者。2/3 為雙側(cè)性，其癌細(xì)胞常以形成囊腔和乳頭 為特征，但或多或少仍保留原來(lái)的組織形態(tài)。有的形成大量有規(guī)則小囊腔，有時(shí)上皮突入腔 內(nèi)形成上皮簇或乳頭的傾向。 組織分級(jí)：高分化（Ⅰ級(jí)）、中分化（Ⅱ級(jí)）、低分化（Ⅲ級(jí)）。 2、粘液性囊腺癌多房性較多，雙側(cè)雖不多，但在卵巢粘液性腫瘤中較良性多，約有5%～ 40%。外觀光滑、圓形或呈分葉狀，切面囊性、多房，伴有實(shí)性區(qū)域。囊內(nèi)壁可見(jiàn)乳頭，但 較漿性癌少。囊腔內(nèi)含血性膠狀粘液，實(shí)性區(qū)常見(jiàn)出血壞死。鏡下特點(diǎn)為：①上皮復(fù)層超過(guò) 3 層；②上皮重度非典型增生，伴有粘液分泌異常；③腺體有背靠現(xiàn)象；④核分裂活躍；⑤ 間質(zhì)浸潤(rùn)。 組織分級(jí)： （1）高分化（Ⅰ級(jí)）：上皮高柱形，上皮增生超過(guò)3 層。乳頭分支細(xì)長(zhǎng)，形態(tài)不規(guī)則，間質(zhì) 極少。乳頭表面細(xì)胞失極性，排列紊亂，核大小不等，分裂相多。有時(shí)粘液分泌過(guò)多逸出細(xì) 胞外，使細(xì)胞質(zhì)界限消失。 （2）中分化（Ⅱ級(jí)）：上皮柱狀或低柱狀，形成共壁，細(xì)胞內(nèi)有少量粘液，間質(zhì)內(nèi)有大量細(xì) 胞巢浸潤(rùn)，核分裂相較多。 （3）低分化（Ⅲ級(jí)）：腺樣結(jié)構(gòu)不明顯，上皮細(xì)胞呈簇狀或彌漫性生長(zhǎng)，細(xì)胞核異型性明顯， 核分裂相更多。細(xì)胞內(nèi)粘液極少。 3、惡性宮內(nèi)膜樣癌腫瘤55%～60%為單側(cè)，囊實(shí)性或大部分實(shí)性，囊液多為血性，有時(shí)伴 有巧克力囊腫。外形光滑或結(jié)節(jié)狀，或有表面乳頭生長(zhǎng)。鏡下表現(xiàn)與子宮內(nèi)膜癌相似，常見(jiàn) 鱗狀上皮化生。根據(jù)腺體形態(tài)排列結(jié)構(gòu)及細(xì)胞分化程度，腫瘤可分成3 級(jí)： （1）高分化（Ⅰ級(jí)）：分化較好，以腺體結(jié)構(gòu)為主，有少量核分裂相。 （2）中分化（Ⅱ級(jí)）：實(shí)性部分占1/2，腺體形態(tài)不規(guī)則，有多量小腺體彼此相連，核分裂 相明顯。 （3）低分化（Ⅲ級(jí)）：腺體結(jié)構(gòu)已很少見(jiàn)，腫瘤細(xì)胞大量增生，破壞了腺腔，形成彌漫一片， 核分裂相增多。 4、惡性透明細(xì)胞瘤多為囊實(shí)性，質(zhì)韌不十分硬，大小不等，單側(cè)多，雙側(cè)可達(dá)24%。切 面呈魚肉狀，或淡黃色。常伴有出血壞死。仔細(xì)檢查，?？砂l(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜異位。鏡下可見(jiàn)透 明細(xì)胞、鞋釘細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞。細(xì)胞核有異形，可見(jiàn)核分裂相。 5、未成熟畸胎瘤腫瘤多為單側(cè)巨大腫物，包膜光滑，但常與周圍組織有粘連或在手術(shù)中易 撕裂。切面多以實(shí)性為主，伴有囊性區(qū)；偶見(jiàn)以囊為主者，囊壁有實(shí)性區(qū)域。實(shí)性區(qū)質(zhì)軟、 細(xì)膩、有出血壞死呈雜色多彩狀，有時(shí)見(jiàn)骨、軟骨、毛發(fā)或腦組織；囊性區(qū)通常充以漿液、 粘液或膠凍樣物。 鏡下見(jiàn)腫瘤由來(lái)自三胚層的成熟和未成熟組織構(gòu)成；外胚層主要是神經(jīng)組織和皮膚，中胚層 以纖維結(jié)締組織、軟骨、骨、肌肉和未分化的間葉組織為多見(jiàn)，內(nèi)胚層主要為腺管樣結(jié)構(gòu)， 有時(shí)可見(jiàn)支氣管或胃腸上皮。這些組織處于不同的成熟階段，無(wú)器官樣排列。未成熟組織主 要是指神經(jīng)上皮組織，可形成菊形團(tuán)或神經(jīng)管結(jié)構(gòu)，也可彌漫成片。根據(jù)腫瘤中這種神經(jīng)上 皮的含量，Norris 等（1976）提出未成熟畸胎瘤的分級(jí)方法，這種分級(jí)對(duì)治療和預(yù)后判斷均 有重要意義。 0 級(jí)：全部為成熟組織。 Ⅰ級(jí)：有少量不成熟組織（主要是膠質(zhì)和原始間充質(zhì)），可見(jiàn)核分裂。神經(jīng)上皮少，每一切 片中僅限于1 個(gè)/40 倍視野。 Ⅱ級(jí)：有較多未成熟組織，每一切片中神經(jīng)上皮的量占4 個(gè)或更多/40 倍視野，并常與肉瘤 樣的間質(zhì)融合。 6、無(wú)性細(xì)胞瘤腫瘤多為單側(cè)，中等大小，呈圓形、分葉狀，包膜光滑，切面灰白色、質(zhì)實(shí)， 可有壞死出血。鏡下見(jiàn)被結(jié)締組織分隔的大圓形或多角形細(xì)胞群，周圍有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。此 瘤常出現(xiàn)各種性腺功能低下或雌雄間體現(xiàn)象。 7、卵巢內(nèi)胚竇瘤（卵黃囊瘤） 多數(shù)為單側(cè)，雙側(cè)多為轉(zhuǎn)移所致。腫瘤通常體積較大，直徑 多超過(guò)10cm，呈圓形或卵圓形，表面光滑，包膜完整，切面灰白，組織脆，間質(zhì)有膠狀粘 液，伴出血，壞死，易破裂。鏡下結(jié)構(gòu)復(fù)雜，主要為疏松網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和內(nèi)胚竇樣結(jié)構(gòu)。瘤細(xì)胞 呈扁平、立方、柱狀或多角形。 8、顆粒細(xì)胞瘤最常見(jiàn)的一種卵巢性索間質(zhì)腫瘤。為低度惡性腫瘤。多為單側(cè)，大小不一， 表面光滑或分葉狀，切面實(shí)性，色淡黃，一部分呈囊性變，有時(shí)有出血壞死。組織學(xué)特點(diǎn)是 顆粒細(xì)胞圍繞小囊呈放射狀排列。顆粒細(xì)胞瘤具有內(nèi)分泌功能，分泌雌激素，青春期前出現(xiàn) 假性早熟，生育年齡引起月經(jīng)紊亂，絕經(jīng)期后內(nèi)膜增生過(guò)長(zhǎng)，甚至發(fā)生腺癌。 |
